将CRISPR-Cas系统与核酸放大策略结合可以实现增强的检测信号,低丰度靶标的富集,以及高度灵敏的诊断方法的开发.
综述
CRISPR-Cas技术与核酸放大策略的结合为快速、灵敏和特异性的核酸、蛋白质和小分子的现场检测提供了强大的平台.
整合CRISPR-Cas系统与核酸放大技术可以提高检测信号,富集低丰度靶标,并开发高度灵敏的诊断方法。Cas12和Cas13的切割活性,以及Cas9的解旋和切口能力。核酸放大后集成CRISPR-Cas系统增加了由于RNA引导识别扩增子特定序列而提高的检测特异性。在核酸放大前结合CRISPR-Cas能够富集稀有和低丰度的核酸靶标,并去除不需要的丰度过高的核酸。使用CRISPR-Cas9在适中温度下将双链DNA解旋为单链DNA,为实现核酸等温指数放大技术提供了便利。将CRISPR-Cas系统与功能性核酸(FNAs)和分子翻译器结合,可以检测非核酸靶标,如蛋白质、金属离子和小分子。成功将CRISPR技术与核酸放大技术结合,使得对引起COVID-19大流行的病毒SARS-CoV-2的检测具有高度灵敏性和快速性.
Feng等人(周五)报告了一项综述。评估了与核酸扩增结合的CRISPR-Cas系统。将CRISPR-Cas系统与核酸扩增策略结合能够增强检测信号、富集低丰度靶标,并开发出高度敏感的诊断工具。
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