关于MALDI质谱中化学噪音的成熟性

所谓的“化学噪音背景”对MALDI质谱的实际灵敏度施加了主要限制。通常，当施加于MALDI分析的目标物质量减少时，信号会降低到无法与化学噪音区分的程度。使用新设计的MALDI离子阱质谱仪，我们描述了旨在揭示化学噪音背景性质并减少其影响的实验。观察到的肽的单级质谱信号在施加到MALDI样品台的样本量减少到小于一飞摩尔时消失在噪音中。在这些低水平下，对碰撞诱导的碎片光谱分析揭示出源自肽的离子以及源自化学噪音的簇离子的存在。簇物种解离产生的碎片化模式表明它们主要由基质分子组成。这些簇离子的显著部分可以在低于肽碎片化阈值的激活能下解离。我们利用这一发现对MALDI离子进行碰撞预激活，以去除谱中显著部分的化学噪音，使我们能够从100阿托摩尔的肽中获得清晰可辨的单级质谱信号。该策略还从100阿托摩尔的肽中获得了高质量的MS/MS光谱。考虑了不同的碰撞预激活可能性以提高灵敏度。