培养中牛肾上腺髓质细胞的稳定性

本研究探讨了肾上腺髓质细胞原代培养的功能稳定性。通过胶原酶处理牛肾上腺，随后在 Percoll 密度梯度上纯化制备分离细胞，并维持在含有 10% 胎牛血清的 Dulbecco's 培养基中。接种于塑料培养皿后 12 h 内，细胞牢固贴壁并在长达 3 周的时间内表现出良好的存活率，这通过光镜和电镜下的形态学观察、儿茶酚胺、酪氨酸羟化酶、多巴胺-β-羟化酶和苯乙醇胺 N-甲基转移酶含量的维持，以及其对促分泌剂的反应能力得到证实。在培养的前 10 天至 2 周内，所有这些参数几乎没有或完全没有改变。在第 3 周期间，儿茶酚胺和酶活性逐渐丧失，且髓质细胞空泡化增加。在所研究的时期内，细胞合成了蛋白质和 RNA，且活性无明显丧失，但未将 3Hthymidine 掺入 PCA 可沉淀物质中。细胞对促分泌剂和分泌拮抗剂的反应与离体灌流肾上腺相似。本文描述的研究表明，肾上腺髓质细胞的原代培养为获取有关刺激-分泌偶联及肾上腺髓质其他功能方面的更详细信息提供了极佳的实验系统。