Collapsin Response Mediator Protein-1与癌细胞的侵袭和转移

背景：许多基因改变与癌细胞的转移和侵袭相关。为了识别差异表达的侵袭相关基因，我们筛选了一组肺癌细胞系（按侵袭活动递增的顺序为CL(1-0)、CL(1-1)、CL(1-5)和CL(1-5)-F(4)），并选择了一个基因，即collapsin response mediator protein-1（CRMP-1），进行特征分析。方法：我们使用含有9600个基因序列的微阵列评估细胞组中的基因表达，并选择差异表达的CRMP-1基因进行进一步研究。我们通过北方和西方印迹分析确认了CRMP-1的差异表达。在高度侵袭性的CL(1-5)细胞中转染并过表达CRMP-1后，通过形态学评估和体外侵袭实验进行评估。我们使用增强型绿色荧光蛋白标记的CRMP-1和荧光显微镜定位CRMP-1的细胞内位置。在80个肺癌标本中通过实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）确定CRMP-1的表达。所有统计检验均为双侧结果。结果：在细胞组中，CRMP-1的表达与侵袭活动呈负相关，此观察得到了北方和西方印迹分析的证实。转染CRMP-1的CL(1-5)细胞变得圆形，且细胞丝足较少，体外侵袭活动显著低于未转染细胞（所有P< .001）。在间期，CRMP-1蛋白均匀分布在细胞质中，有时出现在细胞核内；在有丝分裂期间，CRMP-1与有丝分裂纺锤体、中心体及中体相关（在后期分裂中）。实时RT-PCR对肺癌标本的分析显示，CRMP-1表达降低与晚期疾病（III期或IV期；P = .010）、淋巴结转移（N1、N2和N3；P = .043）、早期术后复发（P = .030）和较短生存期（P = .016）显著相关。结论：CRMP-1似乎与癌症的侵袭和转移有关，可能是一个侵袭抑制基因。