氨基末端结构域在明胶酶B的激活、蛋白酶活性和组织金属蛋白酶抑制剂相互作用中的作用分析。

重组人原明胶酶B和一个氨基末端截短版本，原-delta426-688明胶酶B，已从骨髓瘤细胞表达系统中制备。两种前酶都可以通过类纤溶酶-1处理转化为活性形式，得到一个氨基端的Phe88，或通过与4-氨基苯汞乙酸的处理得到一个氨基末端的Met75。使用任一处理的激活动力学不受酶氨基末端结构域去除的影响。使用任一方法激活的明胶酶B和delta426-688明胶酶B的特异性活性发现是相似的，底物使用淬灭荧光肽或明胶。实验表明成纤维细胞单层在存在纤溶酶原或前类纤溶酶-1的情况下以相似的速率介导对两种原明胶酶的加工。活性野生型明胶酶B被组织金属蛋白酶抑制剂（TIMP）-1以比TIMP-2快得多的速率抑制。对任一酶或抑制剂的氨基末端截短显著降低了TIMP-1抑制的速率常数，但对TIMP-2结合的速率没有影响。可以得出结论，原明胶酶B的氨基末端结构域不参与自溶或细胞激活，也不影响酶的催化活性。然而，活性明胶酶B与TIMP-1之间的氨基末端结构域相互作用显著增强了复合物形成的速率。