血管动蛋白家族成员的肌动蛋白结合和细胞增殖活性受 Hippo 通路介导的磷酸化调节

Hippo 通路除 YAP 和 TAZ 外是否存在其他下游靶点尚属未知。在本报告中，我们将血管动蛋白 (Amot) 家族成员鉴定为 Hippo 核心激酶的新型底物。Amot 蛋白的 N 端区域包含一个保守的用于 LATS1/2 介导磷酸化的 HXRXXS 共有位点。磷酸化特异性抗体显示，Hippo 核心激酶可以介导内源性以及外源性 Amot 家族成员的磷酸化。内源性敲低 LATS1 和 LATS2 降低了磷酸化特异性抗体检测到的 Amots 磷酸化水平。在 Amot 和 AmotL2 中将该 HXRXXS 位点内的丝氨酸突变为丙氨酸，证实了该位点对 Hippo 核心激酶介导的磷酸化至关重要。野生型和非磷酸化 Amot (Amot-S175A) 定位于肌动蛋白丝，而模拟磷酸化的 Amot (Amot-S175D) 未能与肌动蛋白共定位。LATS2 的过表达引起 Amot 从肌动蛋白上解离，但对 Amot-S175A 无此作用。对 Amot 肌动蛋白结合位点的作图显示，Amot 的丝氨酸 175 对其肌动蛋白结合活性非常重要。Amot-S175A 促进细胞增殖，而 Amot 和 Amot-S175D 则抑制细胞增殖。这些结果共同表明，Hippo 通路通过直接磷酸化负调控 Amot 家族成员的肌动蛋白结合活性。Hippo 通路除 YAP 和 TAZ 外是否存在其他下游靶点尚属未知。在本报告中，我们将血管动蛋白 (Amot) 家族成员鉴定为 Hippo 核心激酶的新型底物。Amot 蛋白的 N 端区域包含一个保守的用于 LATS1/2 介导磷酸化的 HXRXXS 共有位点。磷酸化特异性抗体显示，Hippo 核心激酶可以介导内源性以及外源性 Amot 家族成员的磷酸化。内源性敲低 LATS1 和 LATS2 降低了磷酸化特异性抗体检测到的 Amots 磷酸化水平。在 Amot 和 AmotL2 中将该 HXRXXS 位点内的丝氨酸突变为丙氨酸，证实了该位点对 Hippo 核心激酶介导的磷酸化至关重要。野生型和非磷酸化 Amot (Amot-S175A) 定位于肌动蛋白丝，而模拟磷酸化的 Amot (Amot-S175D) 未能与肌动蛋白共定位。LATS2 的过表达引起 Amot 从肌动蛋白上解离，但对 Amot-S175A 无此作用。对 Amot 肌动蛋白结合位点的作图显示，Amot 的丝氨酸 175 对其肌动蛋白结合活性非常重要。Amot-S175A 促进细胞增殖，而 Amot 和 Amot-S175D 则抑制细胞增殖。这些结果共同表明，Hippo 通路通过直接磷酸化负调控 Amot 家族成员的肌动蛋白结合活性。