黄酮对4-甲基伭香酸的淬灭效应：荧光酶抑制测定中的潜在陷阱

许多旨在测试合成分子和天然产物对神经氨酸酶活性的抑制效果的测定方法利用2′-O-(4-甲基伭香酰)-N-乙酰神经氨酸（4-MUNANA）的水解。随后，通过荧光法测量释放的产物4-甲基伭香酸（4-MU）的量。作者试图分析35种天然黄酮对神经氨酸酶N3的抑制特性，其中仅有29种在测定介质中具有足够的溶解度。分析过程中，作者注意到测试化合物对4-MU荧光存在强烈的淬灭效应。根据Stern-Volmer方法确定了黄酮的淬灭常数。由于淬灭引起的荧光减少程度与在抑制测定中测得的荧光减少幅度相当：在29种化合物中，有11种的两个值在实验不确定性范围内是一致的。通过计算相关的Pearson相关系数，对这些数据进行了统计分析以寻找相关性。结果发现，抑制和淬灭之间具有正相关性（r = 0.71，p（未校正）= 1.5 × 10–5），并且这种相关性在整个测试化合物集上保持不变。总体而言，收集的数据暗示所有测试的黄酮都可能在使用4-MUNANA作为底物的神经氨酸酶抑制测定中产生假阳性结果。