揭示心包分泌组的复杂性

心包是一层覆盖心脏的上皮层，在胚胎心脏发育和成人心脏损伤反应中发挥关键作用。已知心包分泌的分子因子参与调节这些现象，但这种调节如何发生却知之甚少。在本研究中，我们使用持续的小鼠胚胎源心包细胞（EPIC）系，研究了心包分泌组的细胞外囊泡（EV）和细胞外基质（ECM）成分。通过差速超离心从1%（EVs-H1%）、5%（EVs-H5%）和21%氧气（EVs-N）条件下培养的EPIC中分离出心包源EV。EV的蛋白质含量通过串联质谱标签（TMT）蛋白组学分析确定。结果表明，心包源EV的货物对亲细胞的氧气水平敏感，随着氧气水平降低，其对糖酵解蛋白的含量增加。此外，缺氧源EV被发现既能增加EPIC增殖，又能影响人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的代谢。另一方面，心包源细胞外基质（EPIC-ECM）通过将去细胞化的EPIC提交给霰弹枪蛋白组学进行表征，并与去细胞化的围产期心脏和Matrigel®进行比较。我们发现EPIC-ECM的组成与胚胎心脏组织非常相似。尽管EPIC-ECM的结构和基底膜相关蛋白与Matrigel®中的蛋白相似，EPIC-ECM表现出更高的蛋白质多样性，并且是HUVEC增殖的更强诱导因子。这项工作代表了对心包源分泌组两个重要成分的首次综合和系统的蛋白组学分析。我们的实验表明，心包通过分泌能够修改周围细胞代谢反应的EV对缺氧做出反应。此外，EPIC-ECM促进内皮细胞增殖。这些发现展示了心包分泌组显著的信号传导能力及其对心脏发育的潜在贡献，这与心脏缺血损伤后内皮细胞反应的报告一致。