进一步证据表明哺乳动物细胞中糖原合酶激酶-3 (GSK3) 的酪氨酸磷酸化是一个自磷酸化事件

内源性 GSK3alpha（糖原合酶激酶-3alpha）在 Tyr279 位点的磷酸化和 GSK3beta 在 Tyr216 位点的磷酸化在 HEK-293 或 SH-SY5Y 细胞中被 GSK3 的药理抑制剂抑制，但不受 Src 家族抑制剂 4-amino-5-(4-chlorophenyl)-7-(t-butyl)pyrazolo3,4-d pyrimidine (PP2) 或通用蛋白酪氨酸激酶抑制剂（青蒿琥酯）的影响。转染 GSK3beta 的 HEK-293 细胞或大肠杆菌在 Tyr216 位点磷酸化，但催化无活性的突变体则没有。以昆虫 Sf 21 细胞或大肠杆菌表达的 GSK3beta 在 Tyr216 位点被广泛磷酸化，但在该位置缺乏磷酸的少量分子可以在与 MgATP 的孵育后在体外进行 Tyr216 处的自磷酸化。自磷酸化的速率不受稀释影响，并且被 GSK3 抑制剂 kenpaullone 抑制。野生型 GSK3beta 无法催化缺乏 Tyr216 位点磷酸的催化无活性 GSK3beta 的酪氨酸磷酸化。我们的结果表明，GSK3 的酪氨酸磷酸化是在我们研究的细胞中一种分子内自磷酸化事件，并且这种修饰增强了该酶的稳定性.