针对 lenvatinib 耐药肝细胞癌的全基因组 CRISPR-Cas9 敲除筛选

Lenvatinib 是获批用于晚期肝细胞癌 (HCC) 的首个靶向药物。然而，耐药性的产生十分普遍，且 HCC 中 lenvatinib 耐药的机制及耐药靶点仍知之甚少。通过使用 CRISPR/Cas9 文库筛选，我们筛选出两个关键耐药基因：神经纤维瘤蛋白 1 (NF1) 和双特异性磷酸酶 9 (DUSP9)，它们是 HCC 中 lenvatinib 耐药的关键驱动因素。借助 RNAi 敲低和 CRISPR/Cas9 敲除模型，我们进一步阐明了 NF1 缺失重新激活 PI3K/AKT 和 MAPK/ERK 信号通路，而 DUSP9 缺失激活 MAPK/ERK 信号通路，从而使 FOXO3 失活并随后引起 FOXO3 降解，最终诱导 lenvatinib 耐药的机制。我们还筛选出了 MEK 小分子通路抑制剂 trametinib，可用于逆转 HCC 细胞中由 NF1 和 DUSP9 缺失诱导的耐药性。在小鼠中敲除 NF1 的情况下，trametinib 仍能够阻止 HCC 生长。综上所述，这些研究结果表明 NF1 和 DUSP9 在 lenvatinib 耐药中起着关键作用，并可能成为 HCC 中 lenvatinib 耐药的新型特异性靶点和预测性标志物。