日本脑炎病毒通过pH依赖、动力蛋白和囊泡介导的内吞途径进入大鼠神经母细胞瘤细胞

日本脑炎病毒（JEV）是一种由蚊子传播的黄病毒，也是病毒性脑炎最常见的病原体之一。JEV进入宿主细胞的感染过程仍然 largely unknown。在这里，我们呈现了一项关于JEV进入B104大鼠神经母细胞瘤细胞的细胞内机制的系统研究。观察到JEV的内化被氯喹和氯化铵抑制，这两者均可提高酸性细胞器的pH。然而，JEV的进入不受氯丙嗪、EPS 15蛋白的显性负型过表达或小干扰RNA（siRNA）沉默网格蛋白重链的影响。这些结果表明，JEV的进入依赖于酸性细胞内pH，但与网格蛋白无关。我们发现JEV的内吞依赖于膜胆固醇，并且通过siRNA或显性负突变体的羟基化抑制了对囊泡1的作用。通过使用抑制剂dynasore、K44A突变体和特定siRNA，还表明动力蛋白是JEV进入所必需的。吞噬作用或大吞噬作用在JEV内化中没有发挥作用。此外，我们通过评估药理学抑制剂对不同基因型JEV内化的影响，表明JEV进入神经母细胞瘤细胞不是病毒株特异性的。总之，我们的结果表明，JEV通过动力蛋白依赖的囊泡介导的摄取进入B104细胞，并具有pH依赖性步骤，这与大多数黄病毒所使用的网格蛋白介导的内吞作用不同。