吞噬体的分子特征

新形成的吞噬体转化为成熟的吞噬溶酶体是一个涉及吞噬体与其他液泡细胞器之间复杂相互作用的过程。吞噬体介导这些相互作用所需的机制尚不清楚。在本研究中，我们让人类和多种啮齿动物细胞摄取乳胶颗粒，这些颗粒的密度有助于使用不连续的蔗糖梯度进行简单的吞噬体纯化。通过这一系统，我们开始对吞噬体蛋白进行系统研究，使用二维凝胶电泳和当前可用的二维凝胶蛋白数据库。通过这种方法，我们能够识别出一组与小鼠J774吞噬体-吞噬溶酶体相关的多肽，包括外 annexin II、annexin VI、三聚体G蛋白的beta-1和beta-2亚基，以及一组结合肌动蛋白的蛋白。虽然annexin II与吞噬体的关联量在乳胶内化的所有阶段都相似，但annexin VI在晚期吞噬体上的水平较高。对在吞噬溶酶体形成早期和晚期时点分离的J774吞噬体进行的磷脂分析也显示了它们的脂质组成存在显著差异。在人类吞噬体中，我们在二维凝胶上分离出超过200种多肽。这些包括在小鼠中描述的蛋白，以及32种在吞噬体中高度富集的多肽，其中15种在当前数据库中不存在。结果表明，使用乳胶颗粒吞噬体是识别参与吞噬溶酶体生物发生的关键分子的有效系统。