Tel1 和 Rif2 在 DNA 双链断裂的末端连接和修复中调节 MRX 功能

细胞对 DNA 双链断裂 (DSBs) 的反应由 MRX/MRN 复合物 (酵母中的 Mre11-Rad50-Xrs2; 哺乳动物中的 Mre11-Rad50-Nbs1) 启动，该复合物将检查点激酶 Tel1/ATM 招募到 DSBs。在酿酒酵母中，Tel1 在 DSBs 中的作用仍然充满谜团，因为 tel1Δ 细胞对诱导 DSB 的因子并没有表现出明显的超敏感性。通过进行合成表型筛选，我们分离出一种使 tel1Δ 细胞对基因毒性因子敏感的 rad50-V1269M 等位基因。MRV1269MX 复合物与 DNA 末端的结合较差，并且由于缺乏 Tel1，其在 DSB 处的保留进一步减少。因此，tel1Δ rad50-V1269M 细胞在保持 DSB 末端相互连接和通过同源重组 (HR) 或非同源末端连接 (NHEJ) 修复 DSB 方面都存在严重缺陷。这些数据表明，Tel1 促进 MRX 在 DSB 处的保留，而这一功能对于正确的 MRX-DNA 结合（所需的末端连接和 DSB 修复）非常重要。Tel1 促进 MRX 在 DSB 处积累的作用受到 Rif2 的抵消，后者被招募到 DSB 处。我们还发现 Rif2 通过增强 MRX 的 ATP 水解并削弱 MRX 在末端连接中的功能，从而调节 MRX 在 DSB 处的活性，这表明 Rif2 可以通过调节 Rad50 的 ATP 依赖性构象变化来调节 MRX 功能。