在磷脂小泡中与鸟苷酸调节蛋白的功能再构建α2-肾上腺素受体。

我们描述了在磷脂小泡中成功再构建抑制性腺苷酸环化酶耦合受体与各种核苷酸结合调节蛋白之间的功能相互作用。该受体为α2-肾上腺素受体（α2AR），已从人类血小板膜中部分纯化（约500-5000倍）。核苷酸结合调节蛋白包括人类红细胞Ni和Ns的纯化制备、牛视网膜转导素及最近发现的牛脑No。向含有α2AR和Ni的小泡中添加生理配体肾上腺素可刺激Ni的GTP酶活性。在α-肾上腺素拮抗剂酚苄明存在下，肾上腺素对GTP酶活性的刺激被阻止，这表明已经建立了α2AR与Ni的功能再构建。α2AR介导的肾上腺素刺激Ni中GTP酶活性的最大周转数与β-肾上腺素受体介导的异丙肾上腺素刺激Ns中的GTP酶活性及视紫质介导的光刺激转导素中的GTP酶活性相似（每摩尔核苷酸调节蛋白每分钟释放0.5-1.5摩尔Pi）。在与各种核苷酸结合调节蛋白的相互作用中，α2AR与视紫质之间观察到功能相似性。因此，这两种受体蛋白都能够促进Ni和No的最大激活，而在促进Ns的激活方面效果则要低得多。然而，α2AR与视紫质在与转导素的相互作用上存在差异。具体而言，虽然视紫质能够最大激活转导素，但α2AR在促进此激活方面效果要小得多（即约为视紫质的20%）。总体而言，这些结果表明以下相互作用的特异性：对于视紫质，转导素大约等于Ni，大约等于No，远大于Ns；而对于α2AR，Ni大约等于No，大于转导素，大于或等于Ns。