流感病毒基因表达的控制：感染细胞中每种病毒RNA物质的定量分析

我们建立了一个定量杂交系统，通过该系统，对8个基因组片段的三种类型的流感病毒RNA（vRNA、mRNA和cRNA）进行单独测量。作为杂交探针，利用SP-6转录系统生产了32P标记的正负极性RNA，并在大量摩尔过量中使用，足以克服病毒RNA样本中存在的互补RNA。利用该系统，我们研究了在感染A/Udorn/72 (H3N2)的MDCK细胞中每种病毒RNA物质合成的控制。我们的新观察结果如下：1）在初级转录阶段观察到了片段特异性的转录；2）病毒基因组的复制几乎同时开始于所有片段。对于携带晚基因的片段，复制没有观察到延迟；3）除了在转录水平的控制外，病毒晚基因的表达在某些转录后步骤中受到调控。这些结果与之前报道的概念不相符，因此促使我们提出对病毒晚基因表达的独特调控机制。