克鲁斯锥虫转唾液酸酶通过共价唾液酸−酶中间体作用：酪氨酸是催化亲核试剂

修改的唾液酸底物已被用来标记克鲁斯锥虫转唾液酸酶，表明该酶通过共价糖苷−酶中间体催化唾液酸的转移，这一机制在大多数保留型糖苷酶中都是常见的。对标记蛋白进行胃蛋白酶消化，随后进行LC-MS/MS分析，确定Tyr342为催化亲核试剂。这是保留型糖苷酶利用芳基糖苷中间体的首个例子。建议这种替代亲核试剂的选择是唾液酸化学性质的结果。引入一个Tyr/Glu对，从远处的谷氨酸传递电荷，从而避免与唾液酸羧酸根之间的静电排斥。