来自大鼠脑的可溶性金属内肽酶

一种在中性pH下最活跃的金属内肽酶从脑匀浆的可溶性部分中纯化得到。该酶（分子量约67000）受到金属螯合剂如EDTA和邻菲啰啉的强烈抑制。经EDTA处理的酶可以被包括Zn2+、Co2+和Mn2+在内的多种二价金属离子再激活。利用一系列模型合成底物研究了该酶的特异性和动力学参数。该酶优先水解P1位点上由芳香族氨基酸残基提供的羰基的肽键。与P'3和P1位置或P'3以及P1和P2位置中含有芳香族残基的底物相比，获得了最低的Km值和最高的Kcat/Km比率。与P1位置中含有精氨酸残基的底物相比，kcat/Km比率较低，而那些具有甘氨酸或天冬氨酸残基的底物的比率则更低。在P1或P'1任一位置引入D-氨基酸残基会使底物完全抵抗水解。特异性研究表明，该金属内肽酶的活性位点可以容纳至少五个氨基酸残基，其中两个残基在水解键的N末端侧结合，三个残基在C末端侧结合。几种生物活性肽在与通过模型合成底物研究推导出的特异性一致的位置被该酶切割。