绿原酸通过阻断 miR-21 调控的 TGF-β1/Smad7 信号通路在体内和体外抑制肝纤维化

目的：绿原酸（CGA）是一种具有广泛药理作用的酚酸。然而，CGA 对肝纤维化的保护作用及其机制尚不明确。本研究在肝星状细胞 LX2 细胞系和 CCl4 诱导的 Sprague-Dawley 大鼠肝纤维化模型中，探讨了 CGA 对 miR-21 调控的 TGF-β1/Smad7 肝纤维化的影响。方法：检测了 LX2 细胞和肝组织中 miR-21、Smad7、结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶抑制剂 1（TIMP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的 mRNA 表达，以及 Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad7、CTGF、α-SMA、TIMP-1、MMP-9 和 TGF-β1 的蛋白水平。在 LX2 细胞中分析了 miR-21 敲低或过表达后 CGA 的作用。收集肝组织和血清进行组织病理学检查、免疫组织化学（IHC）和 ELISA。结果：在体内和体外实验中，CGA 均抑制了 miR-21、CTGF、α-SMA、TIMP-1 和 TGF-β1 的 mRNA 表达以及 p-Smad2、p-Smad3、p-Smad2/3、CTGF、α-SMA、TIMP-1 和 TGF-β1 的蛋白表达。同时，CGA 提高了 Smad7 和 MMP-9 的 mRNA 及蛋白表达。在 miR-21 敲低和过表达后，下游分子也发生了相应改变。CGA 还减轻了病理表现中的肝纤维化程度，并降低了肝组织中 α-SMA 和 collagen I 的表达以及血清中的 TGF-β1 水平。结论：CGA 可能通过 miR-21 调控的 TGF-β1/Smad7 信号通路缓解肝纤维化，这提示 CGA 可能是一种能够改善肝纤维化的新型抗纤维化药物。