粘附点位置和方向依赖于paxillin、vinculin、zyxin和VASP的动态和分布

粘附点（FAs）是将细胞内细胞骨架与细胞外基质连接的多蛋白结构。它们介导细胞的粘附和迁移，对许多（病理）生理过程至关重要。我们在来自不同物种的两种细胞类型中研究了功能相关的FA蛋白对的结合动态：paxillin和vinculin与zyxin和VASP。在光漂白实验中，约40%的paxillin和vinculin在半小时内稳定地与FA结合。zyxin和VASP则主要表现出更为短暂的相互作用。我们展示了蛋白质结合动态受到FA位置和方向的影响。在靠近附着膜边缘的FA中，paxillin、zyxin和VASP更具动态性，并且结合的比例更大。与该边缘平行的FA相比，垂直于该边缘的FA中，zyxin和VASP也更具动态性，并且结合的比例更大。最后，我们开发了一种光转换测定法，以特异性地可视化亚细胞结构和细胞器内稳定结合的蛋白质。这揭示了虽然paxillin和vinculin在FA中均匀分布，但它们的稳定结合部分在FA复合物内形成小簇。这些簇在paxillin中较为集中，而在vinculin中较少，主要位于FA的近端半部分，那里也有肌动蛋白的进入。