Schnelle und reversible Herabsetzung endogen markierter endosomaler Proteine mittels eines optimierten HaloPROTAC-Degraders

von ∼95 % bei 48 h) Depletion von Halo-markiertem SGK3, was die nachgelagerte Phosphorylierung des SGK3-Substrats NDRG1 blockierte. HaloPROTAC-E induzierte potenter eine höhere steady-state Degradation von Halo-markiertem endogenem VPS34 als die zuvor berichtete HaloPROTAC3-Verbindung. Quantitative globale Proteomik zeigte, dass HaloPROTAC-E bemerkenswert selektiv ist, indem es nur die Degradation des Halo-markierten endogenen VPS34-Komplexes (VPS34, VPS15, Beclin1 und ATG14) induziert und keine anderen Proteine signifikant degradiert wurden. Diese Studie veranschaulicht die Kombination von HaloPROTACs mit CRISPR/Cas9-Tagging endogener Proteine als nützliche Methode zur induzierten schnellen und reversiblen Degradation endogener Proteine zur Untersuchung ihrer Funktion.