目的 探讨地五养肝胶囊(DWYG)含药血清对巨噬细胞M1/M2极化的影响及机制。 方法 将LPS诱导RAW264.7细胞分为空白对照组、模型组、DWYG低剂量组、DWYG中剂量组和DWYG高剂量组。应用Real-time RT-PCR检测不同处理组细胞中iNOS、Arg-1、TNF-α、IL-6、IL-10、Nrf2、HO-1和Keap1的mRNA表达水平。应用ELISA试剂盒检测不同处理组细胞培养上清中TNF-α、IL-6和IL-10的含量。应用流式细胞术检测不同处理组细胞中ROS水平。应用比色法检测不同处理组细胞中GSH/ GSSG比值。应用Western Blotting检测不同处理组细胞中Nrf2、HO-1、Keap1和核内Nrf2的蛋白表达水平。 结果 DWYG含药血清干预降低LPS诱导RAW264.7细胞iNOS、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平,并减少TNF-α和IL-6蛋白分泌水平;却升高Arg-1和IL-10 mRNA表达水平,并增加IL-10蛋白分泌水平。DWYG含药血清干预降低LPS诱导RAW264.7细胞胞内ROS水平,却升高胞内GSH/GSSG比值。同时,DWYG含药血清干预下调LPS诱导RAW264.7细胞Keap1 mRNA和蛋白表达水平,上调Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白表达水平,并促进核内Nrf2蛋白表达。 结论 DWYG含药血清通过活化Nrf2/HO-1信号轴调控巨噬细胞氧化还原状态,促进巨噬细胞M2型极化而发挥抗炎作用。
DENG et al. (Mon,) studied this question.
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