Multiplex-Analyse von EV zeigt spezifische Biomarkerzusammensetzung mit diagnostischer Auswirkung

Exosomen und extrazelluläre Vesikel (EV) werden zunehmend als zirkulierende Biomarker erforscht, aber ihre heterogene Zusammensetzung wird wahrscheinlich die Entwicklung von multiplexen EV-Technologien erforderlich machen. Iterativ multiplexe Analysen von nahezu einzelnen EVs waren bisher herausfordernd und konnten über einige Farben während der spektralen Sensorik nicht hinausgehen. Hier haben wir eine multiplexe EV-Analyse-Technik (MASEV) entwickelt, um tausende einzelner EVs während 5 Zyklen der Mehrkanal-Fluoreszenzfärbung für 15 EV-Biomarker zu untersuchen. Entgegen der gängigen Auffassung zeigen wir, dass: mehrere Marker, die als allgegenwärtig vorgeschlagen werden, weniger verbreitet sind als angenommen; mehrere Biomarker in einzelnen Vesikeln kongruieren, jedoch nur in kleinen Fraktionen; Affinitätsreinigung zu einem Verlust seltener EV-Subtypen führen kann; und tiefes Profiling eine detaillierte Analyse von EV ermöglicht, was möglicherweise den diagnostischen Gehalt verbessert. Diese Erkenntnisse zeigen das Potenzial von MASEV auf, um grundlegende EV-Biologie und Heterogenität aufzudecken und die diagnostische Spezifität zu erhöhen.