Figure 6 de l'activation de la signalisation intrinsèque aux cellules dans les cellules CAR-T via un domaine chimérique IL7R.

La signalisation IL7Rα en chaîne unique stimule l'activation de STAT5 dans les cellules CAR-T. A, Schéma des conditions des cellules T comparées. A : CAR et sIL7 ; B : CAR avec le domaine IL7Rα distal ; C : CAR avec le domaine IL7Rα proximal. B, Niveaux de phosphorylation de STAT5 avant et après exposition à un antigène recombiné fixé sur plaque (rhCD123) pendant 30 minutes, mesurée par un essai TR-FRET. Comparaison entre les conditions avec et sans stimulation rhCD123. n = 3 donneurs, effectuée en double. C, ECAR relatif et (D) OCR relatif des cellules T mesurés après une stimulation rhCD123 de 24 heures dans des milieux sans cytokine. n = 4 donneurs individuels testés en cinq réplicats par essai. Pour chaque donneur, normalisation de toutes les valeurs au niveau de base (contrôle NT) a été effectuée. E, Activité cytotoxique mesurée par un essai basé sur la luminescence. Cellule K562 négative pour CD123 et cellules T NT incluses en tant que contrôles. n = 4 donneurs de cellules T, E:T. La comparaison de la cytotoxicité des cellules T modifiées par rapport à tous les cibles exprimant CD123 avec celle des cellules T NT était très significative (P P P F, Cytotoxicité à long terme mesurée avec six stimulations successives de 48 heures avec les lignées cellulaires AML modifiées eGFP NLS indiquées avec un placement initial à 1:1 E:T (n = 4 donneurs individuels en triplicate technique, chacun normalisé au point temporel 0). G, Décroissance de la demi-vie de chaque lignée cellulaire cible calculée à chaque stimulation. Barres ombrées, intervalles de confiance de 95 % pour la décroissance calculée à chaque point temporel. NT, non transduit.