Cholesterin-Konjugate von kleinen Interferierenden RNAs: Verknüpfungen und Muster der Modifikation

Cholesterin-siRNA-Konjugate ziehen Aufmerksamkeit auf sich, da sie die Lieferung von siRNA in Zellen ohne die Verwendung von Transfektionsmitteln ermöglichen. In dieser Studie verglichen wir die Wirksamkeit und Dauer der durch Cholesterin-Konjugate von selektiv und vollständig modifizierten siRNAs und deren Heteroduplexen derselben Sequenz induzierten Ausschaltung und untersuchten den Einfluss der Verknüpfungslänge zwischen dem 3'-Ende des Sense-Strangs der siRNA und Cholesterin auf die Ausschaltungsaktivität von "leichten" und "schweren" modifizierten siRNAs. Alle 3'-Cholesterin-Konjugate waren unter Transfektion gleich aktiv, aber das Konjugat mit einem C3-Linker war weniger aktiv als die mit längeren Linkern (C8 und C15) in einem trägerfreien Modus. Gleichzeitig waren sie in der Aktivität signifikant unterlegen im Vergleich zum 5'-Cholesterin-Konjugat. Eine Verkürzung des Sense-Strangs, der Cholesterin trägt, um zwei Nukleotide vom 3'-Ende hatte keinen signifikanten Einfluss auf die Aktivität des Konjugats. Der Austausch des Antisense-Strangs oder beider Stränge gegen vollständig modifizierte hatte einen signifikanten Einfluss auf die Ausschaltung sowie auf die Verbesserung der Dauer im trans-fektionsvermittelten und trägerfreien Modus. Eine signifikante 78%ige Unterdrückung der MDR1-Genexpression in KB-8-5-Xenograft-Tumoren, die bei Mäusen entwickelt wurden, verspricht einen Vorteil durch die Verwendung von vollständig modifizierten siRNA-Cholesterin-Konjugaten in der Kombinationstherapie.