本研究的主要目的是开发并优化一种用于检测猪流产相关瘟病毒（PAAPeV）的比色逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）检测方法——PAAPeV 是一种可导致猪发生严重繁殖障碍的新发病原体，目前尚无有效的治疗方法或疫苗。在本研究中，针对 PAAPeV 高度保守的 5′ 非翻译区（5′UTR）设计并筛选了四套 LAMP 引物，用于比色 RT-LAMP 检测。随后根据循环阈值（Ct）值、荧光强度和终点产物的颜色变化，对反应温度、反应时长和内外引物比例这三个反应参数进行了优化。随后，系统验证了优化后的比色 RT-LAMP 检测法的特异性和灵敏度，并将其诊断性能与金标准逆转录荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）进行了比较。结果表明，在 65 °C 孵育 25 min、内外引物比例为 8:1 的条件下，优化后的检测法检出限达到 2 copies/μL，且结果可直接肉眼判读。此外，该检测法表现出高特异性，与其他已知瘟病毒或常见猪病原体无交叉反应。临床样本检测结果显示，比色 RT-LAMP 与 RT-qPCR 的符合率达 100%。综上所述，该比色 RT-LAMP 检测法为临床实验室和现场环境中的 PAAPeV RNA 检测提供了一种快速、灵敏且特异的工具。
Yang et al. (Mon,) 研究了这一问题。