Differenzielle Entwicklung des Maus-Präimplantationsembryos in chemisch definierten Medien1

Wir haben kürzlich die Anwendung von sequentiellen Simplex-Optimierungsmethoden zur Entwicklung eines Mediums (SOM) berichtet, das das Entwicklungsblockade über zwei Zellen hinweg überwindet, die in vitro bei Embryonen aus einer ausgemischten Mauslinien auftritt. Wir haben dieses Medium und mehrere andere hinsichtlich ihrer Fähigkeit untersucht, die Entwicklung von CF1-Weibchen x B6D2F1-Männchen-Mousembryonen bis zur Blastozysten-Stufe zu fördern. Eine Modifikation des Mediums SOM, bezeichnet als KSOM, mit einer erhöhten Konzentration von K+ (2,5 mM), unterstützt ebenfalls das Wachstum über die Zwei-Zellen-Blockade hinaus; verglichen mit anderen getesteten Medien erzielt es eine höhere Kompaktierungsrate (100 %), liefert eine größere Ausbeute an Blastozysten (88 %) und stimuliert eine erhöhte Zellteilungsrate der Trophoblasten. Die Gesamtzellzahl der in KSOM kultivierten Blastozysten (44 +/- 12; n = 30) weist darauf hin, dass 5-6 Zellteilungen möglich sind, wenn Embryonen 96 Stunden von pronukleären Zygoten kultiviert werden. Dies ist eine signifikante Verbesserung der Leistung im Vergleich zu anderen definierten Medien für die Kultur von Zygoten bis zu Blastozysten.