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지질 효모 Yarrowia lipolytica는 지방산 유래 화학물질 생산을 위한 새로운 호스트입니다. 이 효모에 대한 신속한 반복적 대사 공학을 가능하게 하려면 잘 특성화된 유전 부품과 효모에 이를 포함할 수 있는 편리하고 신뢰할 수 있는 방법이 필요합니다. 여기서는 CRISPR/Cas9 기술을 통해 Y. lipolytica에서 높은 유전체 편집 효율로 신속한 균주 구성이 가능하도록 하는 EasyCloneYALI 유전 도구 상자가 제시됩니다. 이 도구 상자는 특성화된 유전체 위치에 유전자 발현 벡터의 마커 없는 통합과 CRISPR/Cas9의 도움을 받아 유전자의 마커 없는 삭제를 허용합니다. 비복제 DNA 수리 조각(예: DNA 올리고)을 사용하는 변환 프로토콜로 80% 이상의 유전체 편집 효율이 달성되었습니다. 또한, 이 도구 상자에는 하이드로 마이신 및 노르세오트리신에 대한 저항성을 부여하는 프로토트로픽 마커가 포함된 일련의 통합 유전자 발현 벡터도 포함됩니다.
Holkenbrink et al. (Mon,)는 이 질문을 연구했습니다.