Effets inhibiteurs de l'urine sur la réaction de polymérase en chaîne pour l'ADN du cytomégalovirus.

Les effets inhibiteurs des échantillons d'urine prélevés sur des nouveau-nés et des enfants plus âgés, dont certains étaient connus pour être infectés par le cytomégalovirus, sur la réaction de polymérase en chaîne (PCR) ont été étudiés. L'urée était le principal composant inhibiteur de l'urine et a inhibé la PCR à une concentration supérieure à 50 mM. Les échantillons d'urine des enfants plus âgés étaient plus inhibiteurs que ceux des nouveau-nés. Cela était corrélé avec la concentration plus élevée d'urée généralement trouvée dans les échantillons d'urine des enfants plus âgés par rapport aux urines néonatales. Deux des 13 échantillons d'urine néonatale, cependant, étaient inhibiteurs malgré de faibles concentrations d'urée -- probablement en raison de métabolites dérivés de la nutrition parentérale. Les effets inhibiteurs de l'urine ont été efficacement éliminés par simple dialyse ou ultrafiltration. La sensibilité et la spécificité de la PCR pour détecter l'ADN du cytomégalovirus dans l'urine ont été encore améliorées en utilisant des amorces "nested" et un protocole de PCR modifié impliquant l'utilisation de réactifs réduits au cours des 20 premiers cycles d'une PCR en deux étapes de 50 cycles.