Ein apoptosehemmendes Baculovirus-Gen mit einem zinkfingerähnlichen Motiv

Spodoptera frugiperda SF-21-Zellen, die mit Mutanten des Autographa californica Nuklearpolyeder-Virus infiziert sind, die ein funktionales p35-Gen fehlen, unterliegen der Apoptose, einer Art programmierten Zelltods. Um p35-homologe Gene in anderen Baculoviren zu identifizieren, wurde die DNA des A. californica Nuklearpolyeder-Virus, die eine Deletion im p35 enthält, zusammen mit Genom-DNAs anderer Baculoviren in SF-21-Zellen cotransfiziert. Eine der viralen DNAs, die in der Lage war, eine Wildtyp-Infektion zu retten, stammte vom Cydia pomonella Granulosevirus (CpGV). Das CpGV-Gen, das für den Effekt verantwortlich war, wurde auf ein 1,6-kb SalI-SstI-Subklon des SalI B-Fragments von CpGV kartiert. Die Sequenz des SalI-SstI-Subklons wies einen offenen Leserahmen auf, der in der Lage war, ein Polypeptid von 31 kDa zu kodieren, was ausreichte, um die Wildtyp-Infektion zu retten; dieses Gen wurde daher iap (Inhibitor der Apoptose) genannt. Die vorhergesagte Sequenz des IAP-Polypeptids zeigte keine signifikante Homologie zu P35, enthielt jedoch ein zinkfingerähnliches Motiv, das auch in anderen Genen vorkommt, die in der Lage sind, die Apoptose zu regulieren, einschließlich mehrerer Säugetier-Protogen-onkogene und zweier Insekten-Gene, die an der embryonalen Entwicklung beteiligt sind. Im Kontext des viralen Genoms waren sowohl iap als auch p35 in der Lage, durch Actinomycin D induzierte Apoptose zu blockieren, was darauf hinweist, dass diese Gene wirken, indem sie die zelluläre Apoptose blockieren, anstatt die virale Stimulation der Apoptose zu verhindern. Mehrere unabhängige rekombinante Viren, die aus Cotransfektionen mit entweder dem gesamten CpGV-Genom oder dem 1,6-kb-Subklon abgeleitet wurden, wurden charakterisiert.