Xpert MTB/RIF 检测的分析性能评估

我们对新型 Xpert MTB/RIF 检测的分析敏感性、分析特异性和动态范围开展了首批研究；该检测是一种基于核酸扩增的诊断系统，可在 2 h 内检测出 Mycobacterium tuberculosis 及 rifampin (RIF) 耐药性。使用来自不同系统发育和地理分布的 79 株 M. tuberculosis 分离株对该检测的敏感性进行了测试，包括 42 株药物敏感分离株和 37 株含有 13 种不同 rpoB 突变或突变组合的 RIF 耐药分离株。使用 89 种非结核细菌、真菌和病毒测试了该检测的特异性。Xpert MTB/RIF 检测正确识别了所有 79 株 M. tuberculosis 分离株，并正确排除了所有 89 株非结核分离株。在所有 37 株耐药分离株中均正确识别了 RIF 耐药性，而在 42 株敏感分离株中均未检出。通过将 10(2) 至 10(7) CFU 的 M. tuberculosis 加入到 M. tuberculosis 阴性痰样本中来评估动态范围。在整个浓度范围内，该检测显示循环阈值与输入的 CFU 之间呈对数线性关系。评估了在 RIF 耐药和 RIF 敏感 DNA 的不同混合物存在下的耐药性检测。耐药性检测取决于特定的突变，样本中需要存在 65% 至 100% 的突变 DNA 才能达到 95% 的耐药性检测确定度。最后，我们研究了检测特异性是否会受到 GenoType MTBDRplus 检测产生的交叉污染扩增子的影响。直到向 1 ml 痰液中掺入至少 10(8) 拷贝的 MTBDRplus 扩增子后才检测到 M. tuberculosis，这表明不太可能发生假阳性结果。