通过原始生殖细胞中高效的 CRISPR 介导同源重组实现鸡种系基因编辑

CRISPR/Cas9 系统已被广泛应用于多种动植物物种的基因组编辑。在鸡中，CRISPR 已被用于敲除体细胞组织中的基因，但尚未见 CRISPR 介导的种系修饰的报道。在本研究中，我们利用 CRISPR 靶向原始生殖细胞（PGCs）中的鸡免疫球蛋白重链基因座，以培育转基因后代。向导 RNA 与供体载体共转染以对双链断裂进行同源定向修复，并筛选出克隆群。获得的所有抗性克隆均包含正确的靶向事件。靶向细胞成功繁育出含有 CRISPR 靶向基因座的健康后代。结果表明，通过在体外利用 CRISPR/Cas9 系统修饰 PGCs 可以获得基因编辑鸡，这为鸟类的高效基因修饰开辟了诸多潜在应用途径。