Liaison synergique du domaine activateur transcriptionnel LuxR de Vibrio fischeri et de l'ARN polymérase à la région promoteur lux.

LuxR, l'activateur du gène de luminescence (lux) de Vibrio fischeri, est le membre le mieux étudié d'une famille de facteurs de transcription bactériens nécessaires à l'expression dépendante de la densité cellulaire de gènes spécifiques impliqués dans les associations avec des hôtes eucaryotes. Ni LuxR ni aucun autre homologue de LuxR n'a été montré comme se liant directement à l'ADN. Nous avons purifié le domaine activateur transcriptionnel C-terminal de LuxR à partir d'extraits d'Escherichia coli recombinante dans laquelle ce polypeptide a été exprimé. Le polypeptide pur, à lui seul, se lie à l'ADN régulateur lux en amont de la boîte lux, un palindrome de 20 paires de bases nécessaire à l'activité de LuxR in vivo, mais il ne se lie pas à la boîte lux. Cependant, le domaine C-terminal de LuxR, en association avec l'ARN polymérase, protège une région incluant la boîte lux et le promoteur de l'opéron lux contre la dégradation par la DNase I. Il y a très peu de protection de la région promoteur de l'opéron lux contre la digestion par la DNase I en présence de l'ARN polymérase seule. Apparemment, il y a une liaison synergique du domaine C-terminal de LuxR et de l'ARN polymérase à la région promotrice. La région de liaison en amont pour le polypeptide pur englobe un site de liaison pour la protéine réceptrice de cAMP (CRP). Dans certaines conditions, la liaison de CRP peut bloquer la liaison du domaine C-terminal de LuxR à la région de liaison en amont, et elle peut également bloquer la liaison synergique du domaine C-terminal de LuxR et de l'ARN polymérase à la boîte lux et à la région promotrice du gène de luminescence. Cette description de la liaison de l'ADN par le domaine C-terminal de LuxR devrait conduire à une compréhension des interactions moléculaires de la famille des activateurs transcriptionnels LuxR avec l'ADN régulateur.