PU.1 recrute un deuxième facteur nucléaire vers un site important pour l'activité de l'activateur 3' de l'immunoglobuline kappa.

PU.1 est un facteur de transcription spécifique aux cellules B et aux macrophages. Par une expérience de décalage de mobilité électrophorétique et des expériences d'interférence de méthylation au sulfate de diméthyle, nous montrons que PU.1 se lie à des séquences d'ADN au sein de l'activateur 3' de l'immunoglobuline kappa (kappa E3'). La liaison de PU.1 à l'activateur kappa E3' facilite la liaison d'un deuxième facteur restreint aux tissus, NF-EM5, à un site adjacent. La liaison de NF-EM5 aux séquences d'ADN kappa E3' nécessite une interaction protéine-protéine avec PU.1 ainsi que des interactions protéine-ADN spécifiques. C'est le premier cas connu d'interaction de PU.1 avec une autre protéine cellulaire. NF-EM5 ne co-fractionne pas avec PU.1, ce qui suggère qu'il s'agit d'une protéine distincte et qu'il n'est pas une modification post-traductionnelle de PU.1. Des études de liaison UV et d'élution à partir de gels de polyacrylamide au sulfate de sodium indiquent que NF-EM5 est une protéine d'environ 46 kDa. Des études de mutagenèse ciblée des sites de liaison de PU.1 et EM5 indiquent que ces sites jouent des rôles importants dans l'activité de l'activateur kappa E3'. En utilisant une série de constructions de suppression de PU.1, nous avons identifié une région dans PU.1 qui est nécessaire pour l'interaction avec NF-EM5. Ce segment englobe une région de 43 acides aminés avec une homologie de séquence PEST, c'est-à-dire une région riche en proline (P), acide glutamique (E), sérine (S) et thréonine (T).