Chemische Charakterisierung des A beta 17-42 Peptids, einer Komponente der diffusen Amyloidablagerungen der Alzheimer-Krankheit

Ein Peptid, das der Aminosäuresequenz von A beta 17-42 (LVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA) entspricht, wurde aus Gehirnen von Alzheimer-Krankheits-Patienten isoliert, die große Ablagerungen von diffusem Amyloid enthalten. Hirnhomogenate wurden in SDS lysiert und hohen Geschwindigkeitszentrifugationen unterzogen. A beta Peptide wurden durch Größenausschlusschromatographie auf Superose 12 und TSK 3000 SW Säulen gereinigt. Ein A beta Peptid mit M(r) von 3.000 wurde wiedergewonnen, das bei automatischer Gasphasen-Edman-Zersetzung die Aminosäuresequenz von A beta ab dem Rest 17 (Leu) lieferte. Das 3-kDa Peptid wurde anschließend mit Trypsin hydrolysiert und mit CNBr umgesetzt, und die resultierenden Peptide wurden durch umgekehrte Phasenhochdruckflüssigchromatographie getrennt und durch Aminosäureanalysen, Peptidmikrosequenzierung und Massenspektrometrie charakterisiert. Die Hydrolyse des beta-Amyloid-Vorläuferproteins 695 an Lys612-Leu613 oder an Lys16-Leu17 seines A beta 1-42 Derivats verhindert die Bildung von neurotoxischen A beta Filamenten, was zur Bildung von A beta 17-42 führt, das in den diffusen Amyloidablagerungen lokalisiert ist. Ein herausragendes Merkmal der Alzheimer-Krankheit ist, dass die vorherrschenden A beta Peptide ihre C-Termini an Position 42 haben, sei es im Kern der neuritischen Plaques, in den Gefäßwänden oder in den diffusen Ablagerungen. Basierend auf diesen Beobachtungen postulieren wir, dass die Ansammlung von unlöslichem A beta N-42 bei der Alzheimer-Krankheit auf die anomal verlaufende Verarbeitung der C-terminalen Region zurückzuführen ist.