Multiples immunomarquages en histologie : une nouvelle méthode utilisant l'inactivation thermique des immunoglobulines.

Nous décrivons une nouvelle méthode pour la détection successive par immunofluorescence de multiples peptides dans des sections de tissu en paraffine unique. Les immunoglobulines ont été inactivées à 130 degrés C après chaque étape de marquage tandis que les tissus étaient protégés par un mélange de solution saline tamponnée au phosphate et de glycérine. La faisabilité de la méthode est démontrée par le double marquage des corticotrophes pituitaires de rat avec l'antisérum anti-ACTH1-24 et anti-ACTH17-39. La méthode est applicable aux tissus cérébraux, car des neurones uniques de l'hypothalamus paraventriculaire ovins ont pu être triplés marqués avec l'antisérum anti-vasopressine, anti-neurophysines I et II, et anti-CRF. Les contrôles d'absorption habituels et les tests de réactivité croisée, ainsi que le marquage des peptides, peuvent être effectués sur la même section de tissu. Cette nouvelle procédure de marquage devrait s'avérer utile en endocrinologie, en pathologie clinique et en neurosciences.