Trennung der erythropoietin-empfindlichen Vorläufer BFU-E und CFU-E im Knochenmark von Mäusen durch Sedimentation unter Einheitsschwerkraft

Die Sedimentationsgeschwindigkeitsprofile der Entitäten im Knochenmark von Mäusen, die für die Bildung erythropoietischer Burst (BFU-E) und für die Bildung erythrozytärer Kolonien (CFU-E) verantwortlich sind, wurden unter Bedingungen untersucht, die darauf abzielen zu bestimmen, ob die beobachteten Werte real sind oder aus Zellinteraktionen resultieren, die während der Kultivierung der Fraktionen auftreten. Knochenmarkzellen von adulten C3Hf/Bi-Mäusen wurden einer Sedimentation unter Einheitsschwerkraft in einem Gradient aus Rinderserumalbumin unterzogen, und Fraktionen wurden in Plasmakultur getestet. Da festgestellt wurde, dass die Zellkonzentration die Effizienz der erythropoietischen Burstbildung in der Kultur beeinflusste, wurden Aliquots bei zwei verschiedenen Zellkonzentrationen sowie in einem festen Verhältnis jeder Fraktion plattiert. Die modal Sedimentationsgeschwindigkeit der BFU-E-Population betrug im Durchschnitt 3,9 mm/h und die der CFU-E-Population 6,4 mm/h; beide erwiesen sich als unabhängig von der Zellkonzentration oder der Methode zur Aufteilung der Fraktionen. Zellen aus Fraktionen mit unterschiedlicher Sedimentationsgeschwindigkeit wurden untereinander oder mit unfraktionierten Zellen gemischt. Es wurde keine signifikante Hemmung oder Stimulation der erythropoietischen Burstbildung beobachtet. Wir schlossen daraus, dass die beobachteten Werte die tatsächlichen modal Sedimentationsgeschwindigkeiten von BFU-E und CFU-E in normalen Mäusen darstellen. Um zu bestimmen, ob eine Änderung des physiologischen Zustands der Tiere die Sedimentationsgeschwindigkeiten von BFU-E oder CFU-E beeinflusste, wurden Knochenmarkzellen von mit roten Zellen hypertransfusionsbehandelten Mäusen mit denen von Kontrolltieren verglichen. Die modal Sedimentationsgeschwindigkeit von BFU-E wurde durch die Hypertransfusion nicht beeinflusst, noch gab es unter diesen Bedingungen eine Änderung in der Anzahl von BFU-E. Die Anzahl von CFU-E war erheblich reduziert, ohne dass es eine signifikante Änderung in der modal Sedimentationsgeschwindigkeit gab.