Colloque spécial : modèles de fixation et de traitement des tissus

Résumé La fixation et le traitement des tissus en blocs de paraffine permettent de couper des sections fines (4-5 microm) de tissus. Les tissus et leurs composants subcellulaires ainsi que le stroma environnant sont visualisés en coupant des sections fines et en les colorant histochimiquement ou immunohistochimiquement, puis en visualisant les sections au microscope à champ clair. Au cours du dernier siècle, les anatomistes et les pathologistes ont utilisé la fixation avec du formaldéhyde tamponné neutre à 10 % (10 % NBF) comme fixatif de choix. De plus, tant les pathologistes humains que vétérinaires ont été formés à utiliser la fixation avec le 10 % NBF, de sorte que ces professionnels sont réticents à changer l'apparence microscopique familière des tissus diagnostiques en utilisant d'autres fixatifs. En outre, les effets du traitement des tissus sur l'apparence microscopique des tissus ont essentiellement été ignorés dans la plupart des études. Les archives de blocs de paraffine de tissus pathologiques contiennent essentiellement des blocs de paraffine fixés dans du 10 % NBF. Par conséquent, si des études rétrospectives utilisent des blocs de paraffine archivés pour corréler les caractéristiques moléculaires des maladies avec leurs issues, les études doivent être basées sur des tissus fixés dans du 10 % NBF. Les études sur la façon dont la fixation dans le 10 % NBF interagit avec les colorations histochimiques et immunohistochimiques sont limitées en nombre et la plupart sont basées sur des temps de fixation relativement longs (> ou = 36 h). Actuellement, les temps de fixation dans le 10 % NBF ont été réduits à < 24 h. On sait peu de choses sur la fixation dans le 10 % NBF et son interaction avec le traitement des tissus pour toute période de fixation, surtout pour les temps courts. On sait encore moins sur la façon dont la fixation des tissus avec le 10 % NBF interagit avec des tests plus modernes utilisant l'immunohistochimie, la réaction en chaîne par polymérase quantitative en temps réel (PCR), et des techniques qui dépendent de l'analyse des protéines extraites des blocs de paraffine, y compris les immunodosages multiplex ou la spectrométrie de masse. En général, plusieurs combinaisons anticorps-antigènes ne fonctionnent pas dans les tissus fixés dans le 10 % NBF, c'est-à-dire que la perte de l'immunoréconnaissance est presque complète pour de telles combinaisons anticorps-antigènes comme Ki67/MIB, le récepteur aux estrogènes alpha (ERalpha) et le récepteur à la progestérone (PR), et partielle pour Bcl-2. Plusieurs modèles ont été développés pour étudier les interactions entre la fixation des tissus et l'immunoréconnaissance, mais la plupart ont considéré le problème de l'immunoréconnaissance comme entièrement causé par la fixation. De plus, certains des modèles discutés dans ce colloque spécial ne prédisent pas les effets de la fixation sur les tissus congelés fixés dans le 10 % NBF et non traités pour faire des blocs de paraffine. Cet article est un bref examen des problèmes liés à l'utilisation du 10 % NBF combiné avec le traitement des tissus comme un processus interconnecté pour étudier les biomarqueurs identifiés par immunohistochimie.