表皮生长因子刺激 A431 细胞中阿米洛利敏感的 22Na+ 摄取。Na+/H+ 交换的证据。

表皮生长因子（EGF）通过推测为 Na+/H+ 逆向转运的电中性、阿米洛利敏感通路增加几种细胞类型中的 Na+ 摄取。由该过程推导出的胞质碱化被认为是促有丝分裂刺激的重要组成部分。我们研究了 EGF 对 A431 细胞 Na+/H+ 交换系统的影响，A431 是一种具有极高 EGF 受体密度但不被 EGF 进行促有丝分裂刺激的细胞系。我们证实 EGF 可迅速激活 A431 细胞中的净 Na+ 内流。阿米洛利抑制 EGF 依赖性 Na+ 摄取（在 3 mM 时抑制率为 65%，ID50 约为 0.3 mM），而对非 EGF 依赖性摄取的抑制作用要小得多。已知 EGF 可增强 A431 细胞中的 45Ca+ 蓄积（Sawyer, S. T., and Cohen, S. (1981) Biochemistry 20, 6280-6286）。以下发现表明，EGF 依赖性 22Na+ 和 45Ca2+ 摄取是两个独立的过程。1）在缺乏细胞外 Ca2+ 的情况下，EGF 能有效刺激阿米洛利敏感的 22Na+ 摄取。2）EGF 依赖性 45Ca2+ 摄取不受阿米洛利抑制。本文描述了一种基于将荧光素标记的葡聚糖导入细胞质来测定细胞内 pH 的新荧光技术。使用该方法证实了 A431 细胞中存在阿米洛利敏感的 Na+/H+ 交换。尽管在 pH 7.3-7.4 以上荧光素荧光缺乏 pH 敏感性阻碍了对 EGF 诱导的细胞内 pH 升高的直接评估，但 22Na+ 通量和细胞内 pH 测量的综合结果表明，EGF 激活了 A431 细胞中的 Na+/H+ 交换。我们得出结论，尽管刺激 Na+/H+ 交换可能构成 EGF 作用机制中的原发事件，但增强的 Na+/H+ 交换在不同细胞类型中不一定与促有丝分裂触发偶联。