Sections minces congelées de tissu frais pour la microscopie électronique, avec une description du pancréas et du foie

Une méthode simple a été développée permettant de couper des sections minces congelées de tissu frais congelé sur un ultramicrotome pratiquement non modifié maintenu à température ambiante. Un flacon Dewar en forme de bol avec un porte-couteau dans ses profondeurs remplace la scène du microtome ; une barre s'étend vers le bas dans le bol à partir du bras de coupe du microtome et supporte le tissu congelé près de son extrémité inférieure. Lorsque le microtome est en fonctionnement, le tissu passe devant un couteau en verre ou en diamant dans les profondeurs du bol comme lors d'une coupe normale. La température de coupe est maintenue en flushant le bol avec du gaz azote froid, et peut être réglée sur n'importe quelle valeur allant d'environ -160 degrés C jusqu'à environ -30 degrés C. Le microtome est réglé pour une épaisseur de coupe de 540-1000 A. Les sections sont récupérées du bord tranchant du couteau sec et sont placées sur des grilles revêtues de membrane, aplaties avec l'extrémité polie d'une tige en cuivre, et soit séchées dans du gaz azote soit lyophilisées. Tout au long du processus, le tissu est maintenu au frais et n'entre en contact avec aucun solvant. La morphologie observée dans les sections minces congelées de pancréas et de foie de rat ressemble généralement à celle des préparations conventionnelles, bien que les dommages liés au gel et le faible contraste limitent le détail pouvant être discerné. Parmi les découvertes inhabituelles se trouve une abondance fréquente de granules mitochondriaux dans le matériel préparé par cette méthode.