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Les vecteurs rétroviraux sont le moyen le plus efficace de livraison stable de gènes aux cellules souches hématopoïétiques (CSH). Cependant, l'expression du transgène à partir de vecteurs rétroviraux est fréquemment soumise à l'influence négative des séquences chromosomiques flanquant le site d'intégration. Dans le cadre du développement de cassette d'expression transgène autonome, nous avons inséré la région de fixation de l'interféron bêta humain (IFN-SAR) et le site hypersensible à la DNase I 5' de la β-globine de poulet (5'HS4) séparément et ensemble dans une série de souches de vecteurs lentiviraux auto-inactivants (SIN). Les cellules transduites de la lignée de progéniteurs hématopoïétiques humains CD34+ KG1a-populations en lot ainsi que des clones individuels hébergeant des intégrants uniques ont été analysées pour l'expression du rapporteur pendant des périodes de culture allant jusqu'à 4 mois. Les vecteurs portant à la fois l'insulateur 5'HS4 et l'IFN-SAR ont systématiquement surpassé les vecteurs de contrôle sans insert ainsi que les vecteurs portant soit un élément soit l'autre. La performance d'un ensemble de vecteurs contenant le répétiteur terminal long du virus des cellules souches murines comme promoteur interne a ensuite été évaluée lors de la différenciation monocytique in vitro des cellules sanguines de cordon CD34+ transduites. Semblable à ce qui a été observé dans le modèle de cellule progénitrice hématopoïétique KG1a, l'expression optimale du rapporteur dans les monocytes primaires a été obtenue avec le vecteur portant les deux éléments régulateurs. Ces résultats indiquent que la combinaison 5'HS4/IFN-SAR est particulièrement efficace pour maintenir des domaines de chromatine ouverts permettant une expression élevée du transgène aux étapes précoces et tardives du développement hématopoïétique, et pourrait donc être utile dans les applications de transfert de gènes médiées par vecteurs rétroviraux dirigés vers les CSH.
Ramezani et al. (Mar,) ont étudié cette question.