Der saccharomyces cerevisiae Kinesin-ähnliche Motor Kar3p wirkt an den Spindelpole vor der Anaphase, um die Anzahl und Länge zytoplasmatischer Mikrotubuli zu begrenzen

Der saccharomyces cerevisiae Kinesin-ähnliche Motor Kar3p, obwohl bekannt dafür, für die Karyogamie erforderlich zu sein, spielt eine schlecht definierte, nicht essentielle Rolle während des vegetativen Wachstums. Wir haben Beweise gefunden, die darauf hindeuten, dass Kar3p in zellzyklus-spezifischer Weise funktioniert, um die Anzahl und Länge zytoplasmatischer Mikrotubuli zu begrenzen. Die Deletion von KAR3 führt zu einem dramatischen Anstieg der zytoplasmatischen Mikrotubuli, ein Phänotyp, der am ausgeprägtesten von START bis zum Beginn der Anaphase ist, aber weniger ausgeprägt während der späten Anaphase in synchronisierten Kulturen. Wir haben HA-markiertes Kar3p im Spindelpole Körperbereich immunlokalisiert, und passenderweise wurde Kar3p in der späten Anaphase nicht nachgewiesen. Eine Mikrotubuli-Depolymerisationsaktivität könnte die Hauptrolle von Kar3p im vegetativen Zustand sein. Die Zugabe von Mikrotubuli-Polymerisationshemmern Nocodazol oder Benomyl zum Medium oder die Deletion des nicht essentiellen Alpha-Tubulin-Gens TUB3 kann größtenteils die abnormalen Mikrotubuli-Anordnungen und andere Wachstumsdefekte von kar3-Mutanten korrigieren, was darauf hindeutet, dass diese Phänotypen aus übermäßiger Mikrotubuli-Polymerisation resultieren. Die Mikrotubuli-Depolymerisation könnte auch der Mechanismus sein, durch den Kar3p in Opposition zu den Anaphase-B-Motoren Cin8p und Kip1p wirkt. Ein Phänotyp eines Spindel-Zusammenbruchs vor der Anaphase von cin8 kip1-Mutanten, der zuvor gezeigt wurde, dass er Kar3p einbezieht, wird erheblich verzögert, wenn die Mikrotubuli-Depolymerisation durch die tub2-150-Mutation gehemmt wird. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass der Kar3p-Motor wirken könnte, um die Länge und Anzahl der Mikrotubuli in der Spindel vor der Anaphase zu regulieren.