TH区室记忆细胞的计数与特征分析

了解辅助T细胞如何在体内分化并在免疫反应发展中发挥其调节作用引起了广泛的兴趣。保护性免疫的发展离不开记忆T细胞的形成。为了在体内研究记忆T细胞，我们首先需要能够识别和表征这些细胞的方法，以便在其复杂微环境中观察它们的发育。我们开发了一种方法，可以直接从小鼠排放的淋巴结中纯化初级和记忆辅助T细胞，这些细胞在体内对鸽子细胞色素c作出反应。这些群体以及个体T细胞的交接序列显示出对CDR3长度和抗原结合特征残基的强烈选择。总体而言，这些研究支持了一种逐步克隆成熟的模型，记忆T细胞库比初级反应更为均质。有一些迹象表明，亲和力成熟可能在重复免疫接种后发生，但规模较小于抗体反应。最后，我们介绍了两种新技术的应用，这些技术有望大大扩展免疫反应在体内的分析。使用流式细胞术同时检测五个和六个荧光参数有助于可靠地解析抗原特异性细胞的稀有亚群，以了解其在体内分化的进展。最后，我们开发了肽/MHC四聚体作为一种新的染色试剂类别，在体内研究T细胞反应中具有广泛的应用价值。