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Fragmentos de ADN de 536 pares de bases que difieren por sustituciones de un solo par de bases se separaron claramente en la electroforesis en gel de gradiente desnaturalizante. Se detectaron transversiones así como transiciones. La correspondencia entre las mediciones del gel de gradiente y la teoría estadística mecánica específica de la secuencia de fusión muestra que las mutaciones que afectan la penetración final del gradiente se encuentran dentro de la primera secuencia de fusión cooperativa. Los fragmentos que llevan sustituciones en dominios que se funden a una temperatura más alta alcanzan posiciones finales en el gel indistinguibles del tipo salvaje. Los datos del gradiente y los sitios de sustitución delimitan el límite entre el primer dominio y su dominio vecino de fusión más alta dentro de ocho pares de bases o menos, de acuerdo con el límite calculado. La correspondencia entre el desplazamiento del gradiente de los mutantes y el cambio calculado en la estabilidad de la hélice permite inferencias sustanciales sobre el tipo de sustitución. La excisión del dominio de fusión más bajo permite el reconocimiento de mutantes en el siguiente dominio de clasificación.
Fischer et al. (Tue,) estudiaron esta cuestión.