Helper-Virus-induziertes T-Zell-Lymphom bei nichtmenschlichen Primaten nach retroviralen genvermittelte Genübertragung.

Das Moloney Murine Leukemia Virus (MoMuLV) verursacht T-Zell-Neoplasmen bei Nagetieren, ist jedoch nicht als Erreger bei Primaten bekannt. Die Gene für das Kapsidprotein und die Enzyme des MoMuLV-Genoms zusammen mit einem amphotropen Hüllengen werden genutzt, um Zelllinien zu entwickeln, die retrovirale Vektoren für aktuelle humanmedizinische Gentechnikanwendungen erzeugen. Wir haben einen Produzentenklon entwickelt, der eine sehr hohe Konzentration von retroviralen Vektorpartikeln erzeugt, um die Bedingungen für die Genintegration in pluripotente hämatopoetische Stammzellen zu optimieren. Diese Produzenten-Zelllinie generiert auch eine viel niedrigere Konzentration von replizierbaren Viren, die durch Rekombination entstanden sind. Stammzellen von Rhesusaffen wurden durch Immunselektion mit einem anti-CD34-Antikörper gereinigt, 80-86 Stunden in vitro in Anwesenheit von retroviralen Vektorpartikeln mit begleitendem replizierbarem Virus inkubiert und verwendet, um Empfänger zu rekonstituieren, deren Knochenmark durch Ganzkörperbestrahlung abgetragen wurde. Das retrovirale Vektor-Genom wurde in zirkulierenden Zellen von fünf der acht Transplantationsempfänger von CD34+-Zellen und in den zirkulierenden Zellen von zwei Empfängern infizierter, unfraktionierter mononuklearer Knochenmarkzellen nachgewiesen. Drei Empfänger von CD34+-Zellen hatten eine produktive Infektion mit replizierbarem Virus. Sechs oder sieben Monate nach der Transplantation entwickelte jedes dieser Tiere eine schnell fortschreitende T-Zell-Neoplasie, die das Thymus, die Lymphknoten, die Leber, die Milz und das Knochenmark betraf. Lymphomzellen enthielten 10-50 Kopien des replizierbaren Virus, aber fehlten das Genom des retroviralen Vektors. Wir schließen daraus, dass replizierbare Viren, die aus Produzenten-Zellen stammen, die retrovirale Vektoren herstellen, bei Primaten pathogen sein können, was die Bedeutung einer sorgfältigen Überprüfung von retroviralen Produzentenklonen, die in humanen Studien verwendet werden, um eine Kontamination mit replizierbarem Virus auszuschließen, unterstreicht.