Genomische Auswirkungen des vermuteten Onkogens G alpha s. Chronische transkriptionale Aktivierung des c-fos Proto-Onkogens in endokrinen Zellen.

Somatische Mutationen der Alpha-Untereinheit von Gs (G alpha s) wurden in einer Vielzahl von endokrinen Tumoren nachgewiesen. Um zu testen, ob G alpha s ein Onkogen ist, haben wir die genomischen Effekte des G alpha s-Proteins untersucht, bei dem die GTPase-Aktivität inaktiviert wurde. Ergebnisse aus transienten Transfektionsstudien zeigen, dass solche Proteine 1) die Transkription eines Reporter-Gens, das durch das minimale cAMP-reaktive Element (TGACGTCA) gesteuert wird, und 2) die c-fos-Transkription in mehreren endokrinen Zelllinien (GH3, AtT20 und PC12) erhöhen. Durch Promoter-Deletion-Analysen und genetische Inaktivierung der cAMP-abhängigen Proteinkinase zeigen wir, dass diese transkriptionelle Stimulation durch G alpha s in mehreren regulatorischen Elementen innerhalb des c-fos-Promotors wirkt und innerhalb der Protein-Kinase A-Wegen operiert. Stabile PC12-Zelllinien wurden etabliert, um die Langzeiteffekte von konstitutiv aktiven G alpha s zu analysieren. Zelllinien, die mutiertes G alpha s exprimieren, haben erhöhte cAMP-Spiegel und erhöhte AP1-Bindungsaktivität. Die Transkription einer Vielzahl von Genen, einschließlich c-fos, c-jun und junB, ist in diesen Zellen erhöht. Die starken und dauerhaften Effekte von G alpha s auf frühe sofortige Gene und insbesondere auf c-fos könnten für das onkogene Potential von G alpha s in endokrinen Zellen verantwortlich sein.