Inmunotinción de ovillos neurofibrilares en la demencia senil de Alzheimer con un antisueros de neurofilamentos

Utilizando antisueros de neurofilamentos de cerebro de pollo, los ovillos neurofibrilares de Alzheimer de dos pacientes con demencia senil fueron teñidos por inmunofluorescencia y por el procedimiento de peroxidasa-antiperoxidasa en secciones de hipocampo y corteza frontal. En secciones de cerebelo obtenidas de los mismos pacientes, la distribución de la inmunotinción fue la misma que la observada en animales experimentales: se demostraron selectivamente cestas de células de Purkinje y fibras nerviosas en la mitad interna de la capa molecular. La inmunotinción de los ovillos fue abolida cuando los antisueros fueron absorbidos por su propio antígeno, por preparaciones de filamentos de cerebro bovino o por la fracción de preparaciones de filamentos de cerebro bovino no absorbidas en columnas de inmunoafinidad de proteína ácida fibrilar glial (GFA). La absorción con una preparación de microtúbulos bovinos aislada por dos ciclos del procedimiento de ensamblaje-desensamblaje no abolió la tinción. Los experimentos de inmunotinción realizados en preparaciones de filamentos de cerebro bovino resueltos en electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio mostraron que los antisueros que tiñen los ovillos reaccionaron con los polipéptidos de neurofilamento de 200,000, 150,000 y 70,000 daltons. Los antisueros levantados contra el polipéptido de neurofilamento bovino de 150,000 daltons aislado por electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio tiñeron el ovillo de manera mucho menos intensa, aunque las cestas de células de Purkinje en el cerebelo aparecieron bien teñidas. No se observó tinción de ovillos neurofibrilares con antisueros de otras clases de proteínas de filamento de 10 nm (proteína GFA, vimentina y desmina).