Identifizierung eines Locus, der für die Regulierung von bvg-repressierten Genen in Bordetella pertussis erforderlich ist

In Bordetella pertussis wird die koordinierte Regulation der Expression von Virulenzfaktoren durch die Produkte des bvgAS-Locus kontrolliert. In Gegenwart von modulierenden Signalen wie MgSO4, Nikotinsäure oder niedriger Temperatur wird die Expression von bvg-aktivierten Genen verringert, während die Expression von bvg-repressierten Genen induziert wird. Ein Modell zur Regulation von bvg-repressierten Genen sagt die Existenz eines Repressorproteins voraus, das durch ein bvg-aktiviertes Gen codiert wird. Nach Aktivierung würde das Produkt dieses bvg-aktivierten Gens an die bvg-repressierten Gene binden und deren Transkription unterdrücken. Wir isolierten fünf genetisch unabhängige Transposon-Insertion-Mutanten von B. pertussis, die einen Phänotyp aufwiesen, der mit dem Knockout eines mutmaßlichen bvg-regulierten Repressors übereinstimmt. Diese Mutanten drückten eine vrg6-phoA-Transkriptionsfusion konstitutionell aus, zeigten jedoch eine normale bvgAS-Funktion. Genomische Mapping- und DNA-Sequenzanalysen der Transposon-Insertionstellen zeigten, dass diese Mutanten einen Locus stromabwärts von bvgAS definieren. Die Einführung einer in-frame 12-bp-Insertion innerhalb dieses Locus führte ebenfalls zum mutantischen Phänotyp, was bestätigte, dass der in den Transposon-Mutanten beobachtete Phänotyp das Ergebnis der Unterbrechung eines bestimmten Gens ist, das wir bvgR genannt haben, und nicht das Ergebnis polarer Effekte auf bvgAS ist.