Clonage et régulation d'un ARN messager exprimé spécifiquement dans l'état préadipeux

Une bibliothèque de cDNA de préadipocytes Ob1771 a été construite, et un clone de cDNA désigné pOb24 a été isolé par dépistage différentiel. L'ARNm pOb24, long de 6 kilobases, a augmenté de manière significative dans les cellules Ob1771 et 3T3-F442A en début de différenciation et a ensuite diminué. Dans le tissu adipeux de souris, il était présent à un niveau élevé dans les cellules stromales-vasculaires (contenant des cellules précurseurs adipeuses) et à un faible niveau dans les adipocytes matures. Ainsi, l'ARNm pOb24 semble être à la fois in vitro et in vivo un marqueur unique de l'état préadipeux, c'est-à-dire de l'engagement cellulaire pendant la différenciation des cellules adipeuses. Contrairement à l'ARNm de la glycérol-3-phosphate déshydrogénase, l'émergence de l'ARNm pOb24 dans les cellules Ob1771 ne nécessitait ni hormone de croissance ni triiodothyronine en tant qu'hormones obligatoires, ni insuline en tant qu'hormone modulatrice. Des études comparatives de l'expression des gènes pOb24 et de la dihydrofolate réductase pendant le cycle cellulaire suggèrent qu'un arrêt à la frontière G1/S était critique pour l'entrée dans l'état préadipeux. Le facteur de nécrose tumorale et le facteur de croissance transformant-beta ont pu induire une grande diminution du niveau d'ARNm pOb24 dans les cellules Ob1771 en arrêt de croissance. Cette diminution a été montrée comme étant confinée uniquement aux cellules en début de différenciation, négatives pour la glycérol-3-phosphate déshydrogénase, car aucune diminution du niveau d'ARNm pOb24 n'a été observée dans les cellules positives pour la glycérol-3-phosphate déshydrogénase. Ce résultat suggère que les signaux générés par le facteur de nécrose tumorale et le facteur de croissance transformant-beta n'ont aucun effet sur un gène lié à l'engagement dans les cellules tardivement différenciées.