检测、分离和刺激急性髓性白血病（AML）患者的静止原始白血病祖细胞

尽管从患者直接分离的许多急性髓性白血病（AML）克隆形成细胞（CFCs）和长期培养起始细胞（LTC-ICs）处于活跃循环状态，但大多数样本中存在静止祖细胞。在当前研究中，(3)H-胸苷((3)H-Tdr)自杀实验显示，在7个AML样本中，6个样本的大多数NOD/SCID小鼠白血病起始细胞(NOD/SL-ICs)处于静止状态。从这些样本中的4个样本中，使用Hoechst 33342/吡罗尼载体染色和细胞分选分离了G(0)、G(1)和S/G(2)+M中的AML细胞。每个亚群的祖细胞含量与(3)H-Tdr自杀结果一致，NOD/SL-ICs几乎仅在G(0)细胞中发现，而AML CFCs和LTC-ICs的循环状态则更为异质。有趣的是，在无血清培养中与或不与Steel因子(SF)、Flt-3配体(FL)和白细胞介素-3(IL-3)的情况下，经过72小时，大多数G(0) AML细胞进入活跃细胞周期（72小时内保持在G(0)的AML细胞百分比，分别在无生长因子(GFs)的培养中为1.2%到37%，有GFs的培养中为0%到7.6%），而来自正常谱系耗竭骨髓的G(0)细胞在缺乏GFs时保持静止。所有4个AML样本均显示自分泌生产2种或更多的SF、FL、IL-3和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的证据。此外，4个样本中有3个包含FLT3基因的内部串联重复。总之，大多数AML患者中均存在静止的白血病细胞，包括NOD/SL-ICs。它们在短期培养中自发进入活跃细胞循环可能是由许多AML中存在的失调的GF信号传导所解释。