Cytokin-induzierte selektive Expansion und Reifung von erythroiden im Vergleich zu myeloischen Vorläuferzellen aus gereinigten Sormblutvorläuferzellen

Um die Rolle verschiedener Cytokin-Kombinationen bei der Proliferation und Differenzierung hochgereinigter primitiver Vorläuferzellen zu untersuchen, wurde ein serumfreies Flüssigkeitskultursystem in Kombination mit phänotypischen und funktionellen Analysen der im Kultur produzierten Zellen verwendet. CD34+ CD45RAlo CD71lo Zellen, aus Nabelschnurblut durch Durchflusszytometrie und Zellselektion gereinigt, wurden für diese Studie ausgewählt aufgrund ihres hohen Anteils an clonogenen Zellen (34%), insbesondere multipotenten Vorläuferzellen (CFU-MIX, 12% aller Zellen). Vier Cytokin-Kombinationen wurden getestet: (1) Mastzellwachstumsfaktor (MGF; ein c-kit Ligand) und Interleukin-6 (IL-6); (2) MGF, IL-6, IL-3 und Erythropoietin (Epo); (3) MGF, IL-6, Granulozyt-Makrophagen-Kolonien- stimulierender Faktor (GM-CSF)/IL-3 Fusionsprotein (FP), Makrophagen-Kolonien- stimulierender Faktor (M-CSF) und Granulozyt-CSF (G-CSF); und (4) MGF, IL-6, FP, M-CSF, G-CSF und Epo. Maximale Zahlen an erythroiden Vorläuferzellen (BFU-E, bis zu 55-fache Erhöhung) und reifen erythroiden Zellen wurden in Anwesenheit von MGF, IL-6, IL-3 und Epo beobachtet, während maximale Niveaus an myeloischen Vorläuferzellen (CFU-C, bis zu 70-fache Erhöhung) und reifen myeloischen Zellen in Kulturen gefunden wurden, die mit MGF, IL-6, FP, M-CSF und G-CSF ergänzt wurden. Als MGF, IL-6, FP, M-CSF, G-CSF und Epo vorhanden waren, wurden maximale Niveaus sowohl erythroider als auch myeloischer Vorläuferzellen und deren Nachkommen beobachtet. Diese Ergebnisse zeigen, dass spezifische Cytokin-Kombinationen direkt auf primitive hämatopoetische Zellen wirken können, was zu einer signifikanten Expansion der Vorläuferzellanzahl führt und deren allgemeine Muster von Proliferation und Differenzierung beeinflusst. Darüber hinaus deuten die in dieser Studie vorgestellten Beobachtungen darauf hin, dass die verwendeten Cytokin-Kombinationen nicht in der Lage waren, die Linienbindung multipotenter Vorläuferzellen zu beeinflussen, sondern vielmehr eine permissive Wirkung auf die Entwicklung von linienbegrenzten clonogenen Zellen hatten.